Die visuelle Erythrozytenzählung

Bei der Erythrozytenzählung werden 10 µl EDTA-Blut (mit Kolbenhubpipette {Eppendorfpipette} aufziehen) in 1990 µl isotoner Erythrozytenverdünnungslösung verdünnt. Dies entspricht einer Verdünnung von 1:200. Diese Suspension muss gut gemischt und sofort in die Zählkammer eingefüllt werden. Nach ca. 3 Minuten sind die Erythrozyten sedimentiert und es kann mit der Auszählung der Erythrozyten in 80 kleinen Quadraten begonnen werden.

Die Berechnung der Erythrozytenzahl geschieht nach dieser Formel unter Verwendung folgender Grössen:

1. der Anzahl der in den kleinen Quadraten gezählten Erythrozyten (Ec),
2. der Verdünnung der Zelllösung,
3. der Anzahl ausgezählter Quadrate
4. dem Volumen über einem Quadrat, und
5. dem Umrechnungsfaktor, der nötig ist, um auf das Volumen von einem Liter zu kommen. Da wir uns im µl-Bereich bewegen, ist dieser gleich 10⁶ (1 µl = 1 x 10^-6 L oder 1 L = 1 x 10⁶ µl).

Anzahl gezählter Erthrozyten(I) x Verdünnung(II) Anzahl ausgezählter Quadrate(III) x Volumen über Quadrat(IV)	=	Erythrozyten µl	=	Erythrozyten x 106(V) L

Beispiel mit 420 gezählten Erythrozyten:

420 Ec x 200 80 x 0.00025 µl	=	84'000 Ec 0.02 µl	=	4'200'000 Ec µl	=	4'200'000 Ec x 106 L	=	4.2 x 1012 Ec/L

Minimale Anzahl zu zählender Erythrozyten = 400

Bei 80 kleinen Quadraten werden bei normalen Erythrozytenwerten rund 400 Erythrozyten gezählt. Dies ergibt ein Variationskoeffizient (Streubreite) von ±5%. Dies ist der maximal tolerierbare zufällige Fehler (Genauigkeit). Sind aber bei einem Patienten die Erythrozyten erniedrigt (Anämien, ausser Thalassämien), nimmt die Streuung zu und somit die Genauigkeit ab. Bei einer Polyzythämie hingegen nimmt mit steigender Erythrozytenzahl prinzipiell die Genauigkeit zu. Wegen Überlagerungen der Erythrozyten muss aber oft eine höhere Verdünnung gewählt werden. Bei tiefen Erythrozytenzahlen muss hingegen die Anzahl ausgezählter Quadrate erhöht oder die Verdünnung (z.B. 1:100) vermindert werden, um die Genauigkeit wieder in den akzeptablen Bereich zu bringen.