Arbeitsplatz und der Utensilien
Der Vorbereitung des Arbeitsplatzes und der Arbeitsutensilien kommt eine grosse Bedeutung zu. Um effizient arbeiten zu können, müssen alle benötigten Materialien griffbereit sein. Hier eine Zusammenstellung:
- eine Arbeitsunterlage (z.B. Papierserviette)
- Blutröhrchen mit EDTA-Blut
- ein Röhrchen mit der Farblösung Neues Methylenblau
- Spitzröhrchen mit Deckel
- entfettete und staubfreie Objektträger
- Tupfer
- eine Pasteurpipette
- eine auf 50 µl eingestellte Eppendorf-Pipette
- dazugehörige Pipettenspitzen
- einen Behälter für den Abfall
Es versteht sich von selbst, dass bei der Arbeit mit Blut immer Handschuhe getragen werden!
Durchführung der Retikulozytenfäbung
- Bestücken Sie die auf 50 µl eingestellte Eppendorf-Pipette mit einer Spitze
- Ziehen Sie die Farblösung auf und entleeren Sie diese in ein Spitzröhrchen
- Verwerfen Sie die Spitze
- Mischen Sie das Blut durch mindestens 30maliges Kippen des Blutröhrchens
- Öffnen Sie mit einem Tupfer das Blutröhrchen
- Ziehen Sie mit der Pasteur-Pipette Blut auf und geben Sie 4-5 Tropfen Blut (beim Vorliegen einer Anämie mehr, beim Vorliegen einer Polyzythämie weniger) in das Spitzröhrchen mit Farblösungv
- Verschliessen Sie das Spitzröhrchen mit dem Deckel und mischen Sie durch sanftes Schütteln und Klopfen den Inhalt
- Lassen Sie das Spitzröhrchen 15 Minuten stehen
- Nach Ablauf dieser Zeit durchmischen Sie den Inhalt des Spitzröhrchens nochmals durch sanftes Schütteln und Klopfen
- Legen Sie zwei Objektträger in einer Linie ausgerichtet nebeneinander
- Geben Sie mit der Pasteur-Pipette einen Tropfen des Blut-Farbgemisches auf ein äusseres Drittel des Objektträgers
- Platzieren Sie die schmale Kante des zweiten Objektträgers in einem Winkel von 45° hinter den Blutstropfen auf den liegenden Objekträger
- Ziehen Sie den Objektträger langsam auf den Blutstropfen und warten Sie, bis sich das Blut entlang der Glaskante verteilt hat
- Senken Sie den Objektträger weiter ab und stossen Sie das Blut langsam über den liegenden Objektträger
- Versehen Sie die Objektträger mit Klebeetiketten , die vorher mit den Personalien des Patienten beschriftet wurden.